Tincion de gram



TINCION DE GRAM•



EQUIPO: Mechero, Microscopio óptico, Platina caliente, Portaobjetos, Guantes, Cubrebocas, Hisopos, Frascos goteros.

SUSTANCIAS: Colorante cristal violeta, Colorante de safranina, Aceite de inmersión, Lugol, Alcohol etílico absoluto, Colorante carbolfucsina, Colorante azul de metileno, Solución de alcohol-acetona, Solución de alcohol ácido.

TÉCNICA:1. Hacer un extendido delgado del material para estudio, y permitir que se seque al aire. 2. Fijar el material al portaobjetos, pasándolo tres o cuatro veces a través de la llama de un mechero de bunsen, de modo que el material no se lave durante el procedimiento de tinción. Se recomienda el uso de alcohol para fijar el material a ser teñido con Gram (cubrir el extendido con metanol o etanol por unos pocos minutos). 3. Colocar el extendido en una bandeja para teñido, y cubrir la superficie con una solución de cristal-violeta. 4. Después de un minuto (con algunas soluciones puede emplearse menos tiempo) de exposición al colorante de cristal violeta, lavar minuciosamente con agua destilada o buffer. 5. Cubrir el extendido con la solución de yodo para Gram durante 1 minuto. Lavar nuevamente con agua. 6. Sostener el extendido entre el pulgar y el índice, y cubrir la superficie con unas pocas gotas del decolorante alcohol-acetona, hasta que no se arrastre mas violeta. Esto lleva usualmente 10 segundos o menos. 7. Lavar con agua corriente y volver a ubicar el extendido sobre la bandeja de tinción. Colocar sobre la superficie safranina de contraste durante un minuto. Lavar con agua corriente. 8. Ubicar el extendido en posición vertical en una bandeja de tinción, permitiendo que se escurra el exceso de agua y el extendido se seque. 9. Examinar el extendido bajo un objetivo de inmersión x 100(aceite).

Las bacterias grampositivas se tiñen de azul obscuro; las gram negativas aparecen rosa pálidas.



COLORACIÓN ALCOHOL-ACIDO-RESITENTESREPORTE DE LA PRÁCTICA.Tipo de muestra: Eses fecales y saliva. Característica de la muestra:se mustran en racimos en cadena y extendidos. El tamaño es de 4x,10x,40x y 100x. Estas son las que observamos se observa que las celulas son de diferentes morfologias y su tamaño es diferente a las demas

Y se muestran los dos tipos d gram las positivas que son las de color azul y las negativas que son las de color rosa.